文摘
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预培养6 d的薰衣草下胚轴在添加100 μmol·L~(-1)乙酰丁香酮(AS)的根癌农杆菌重悬液中浸染10min后共培养2~3d,再经过7~10 d的恢复培养之后用包含10 mg·L~(-1)潮霉素B和200 mg·L~(-1)头孢霉素的筛选培养基进行筛选是较为理想的遗传转化条件.通过GFP观察和GUS染色以及对筛选得到的抗性芽的PCR检测证明,外源目的基因(雪莲冷诱导蛋白基因scp)已整合到薰衣草基因组中,阳性率为40%. |
其他语种文摘
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The factors, including precultivation time, immersion time, cocultivation periods and concentration of acetosyringone (AS), were thoroughly investigated so as to establish the high efficient transformation sys-tem mediated by Agrobacterium tumefaciens of Lavandula angustifolia cv. Munstead. The optimized transfor-mation protocol was obtained when hypocotyls explants precultured for 6 d on regeneration medium were immersed into the diluted Agrobacterium suspension containing 100 umol·L~(-1) AS for 10 min and then were co-cultured for 2-3 d with Agrobacterium and finally were subcultured on selection medium after reinforcing cultivation for 7-10 d on the regeneration medium containing 200 mg·L~(-1) cefotaxime alone. Evidence for stable integration was obtained by GUS staining assay, GFP observation and PCR assay, and the positive rate was40%. |
来源
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植物生理学通讯
,2006,42(5):862-866 【核心库】
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关键词
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薰衣草
;
根癌农杆菌介导
;
遗传转化
;
下胚轴
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地址
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中国科学院新疆理化技术研究所, 乌鲁木齐, 830011
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语种
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中文 |
文献类型
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研究性论文 |
ISSN
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0412-0922 |
学科
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植物学 |
基金
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中国科学院知识创新工程西部行动计划项目
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中国科学院“百人计划”项目
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文献收藏号
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CSCD:2640168
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