唐古特大黄ISSR-PCR反应条件的优化
Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction conditions for Rheum tanguticum

胡延萍谢小龙王莉杨建李毅 ^*

文摘	利用单因素试验对影响唐古特大黄ISSR-PCR扩增的重要参数进行优化,以期建立其最佳反应条件.结果如下:20 μL反应体系包括1.5×PCR buffer(15 mmol/L Tris-HCl,75 mmol/L KCl),1.00 mmol/L MgCl_2,0.6U Taq DNA聚合酶,0.125 mmol/L dNTP,0.5 μmol/L引物和30 ng模板DNA;引物UBC888适宜的退火温度为57.4 ℃.ISSR反应条件的建立为利用分子标记技术研究唐古特大黄居群遗传多样性奠定了良好基础.
其他语种文摘	Inter-Simple Sequence Repeats(ISSR)is a good molecular marker for revealing genetic diversity. Reaction system differed in different species,so optimization of ISSR-PCR reaction is very important. Factors which affect the ISSR-PCR amplification,such as the concentration of Mg~(2+),Taq DNA polymerase,dNTP,primer and template DNA with different annealing temperatures,were optimized and selected by using the genomic DNA of Rheum tanguticum as material. Optimal PCR(20 μL)mix contained 1.5×PCR buffer(15 mmol/L Tris-HCl,75 mmol/L KCl),1.00 mmol/L MgCl_2,0.6 U Taq DNA polymerase,0.125 mmol/L dNTP,0.5 μmol/L primer and 30ng template DNA. The suitable annealing temperature was 57.4 ℃ for primer UBC888. Establishment of the PCR reaction conditions could favor further studies on the genetic diversity of R.tanguticum by using ISSR molecular marker techniques.
来源	广西植物 ,2010,30(1):112-116 【核心库】
关键词	唐古特大黄 ; ISSR-PCR ; 优化
地址	中国科学院西北高原生物研究所, 高原适应与进化重点实验室, 青海, 西宁, 810001
语种	中文
文献类型	研究性论文
ISSN	1000-3142
学科	植物学
基金	国家科技支撑计划项目
文献收藏号	CSCD:3811444